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AAV抗体检测

精确量化AAV中和性抗体滴度——一种新的革命性方法

 

解决挑战,重新定义NAb滴度


在面对精确量化AAV中和性抗体滴度的挑战时,我们引入了一种革命性的方法,重新定义了NAb(Neutralizing Antibody)滴度的测量方式。该方法基于血清样本对AAV颗粒的中和能力,将每毫升血清样本中和的病毒粒子数作为抗体滴度的准确评估指标。

 

基于AAV-CRISPR基因编辑系统的创新方法


我们的研究团队开发了一种基于AAV-CRISPR基因编辑系统的方法,利用AAV载体作为供体模板,在靶细胞的基因组中整合荧光蛋白报告基因。由于AAV-HDR(Homology-Directed Repair)的效率取决于供体模板的拷贝数,当存在NAb抑制时,表达荧光蛋白的细胞比例会减少。

 

流式细胞分析仪的数字化信号量化


通过流式细胞分析仪对荧光细胞的比例进行数字化信号量化,我们能够准确确定样品中的NAb滴度。我们的方法在使用不同细胞系时表现一致,获得的抗体滴度结果没有显著差异。此外,我们的方法确定的NAb滴度与常规转导抑制测定法中的NT50值之间存在良好的相关性(R2> 0.95)。

 

突破性的灵敏性和准确性


令人兴奋的是,我们的方法可以检测到低滴度样品,即使将样本稀释1000倍,仍然可以获得准确的抗体滴度含量。与传统方法相比,我们的方法具有更高的检测敏感性,因此能够应用于更广泛的样本范围,提供更准确可靠的抗体检测结果。

 

重要意义和应用前景


我们的方法采用高度灵敏的AAV-HDR技术和精确的数字化信号,为精确量化AAV中和性抗体滴度提供了一种全新的方法。这一突破对于医学研究和临床诊断具有重要意义,为抗体检测领域带来了更准确和可靠的测量方法。

 

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